DETERMINACION DE CAFEÍNA EN TE, CAFÉ Y YERBA MATE Basado en Método AOAC Modificado
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- Joaquín Salazar Pereyra
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1 ME Página 1 de 5 1. OBJETIVO Determinar el contenido de cafeína en fruitivos como té, café o yerba mate por método Bailey y Andrews. 2. CAMPO DE APLICACIÓN Y ALCANCE El método es aplicable a muestras de té, café y yerba mate. 3. FUNDAMENTO Se basa en la extracción y separación de la cafeína con solventes y posterior purificación y cuantificación del residuo por gravimetría. 4. DOCUMENTOS DE REFERENCIAS AOAC official Method Caffeine in tea Modified Bailey- Andrew Method. AOAC 18 th Edition, TERMINOLOGÍA Cafeína: Cafeína es un alcaloide del grupo de las xantinas, sólido cristalino, blanco y de sabor amargo, que actúa como una droga psicoactiva y estimulante. Cafeína Gravimetría: Un método analítico cuantitativo para determinar la cantidad de una sustancia midiendo su peso. DUEÑO DE PROCESO: Encargado Laboratorio de Nutrientes, Aditivos y Contaminantes. ESTE DOCUMENTO FUERA DE LA INTRANET O IMPRESO SIN TIMBRE DE DOCUMENTO CONTROLADO SE CONSIDERA COPIA NO CONTROLADA APROBADO: Jefe Subdepartamento de Alimentos y Nutricion
2 ME Página 2 de 5 6. REACTIVOS, INSUMOS Y EQUIPOS 6.1 REACTIVOS Cloroformo. p.a Oxido de Magnesio p.a Sulfato de sodio anhidro. p.a. 6.2 INSUMOS Matraz Erlenmeyer 500 ml Papel filtro Whatman Nº Material usual de laboratorio Embudo decantación 500 ml 6.3 EQUIPOS Balanza analítica sensibilidad 0,01 g Baño de agua termorregulado temperatura de ebullición Estufa 105 ºC Campana de Extracción Química 7. DESCRIPCIÓN DE ACTIVIDADES 7.1 Muestreo /Muestra El ingreso de la muestra para su análisis debe cumplir con el Instructivo de Aceptación o Rechazo de muestras IT Preparación de Reactivos Solución de ácido sulfúrico (1+9).Disolver una parte de ácido sulfúrico concentrado (d: 1.83) en nueve partes de agua. Solución de hidróxido de potasio al 1 %. Disolver 1 g de hidróxido de potasio, p.a. y enrasar a 100 ml
3 ME Página 3 de Preparación de curva de calibración. No aplica 7.4 Preparación de controles. No aplica. 7.5 Preparación de la Muestra o etapas previas a realizar la medición. Homogeneizar la muestra pulverizada y tamizada. 7.6 Análisis de la muestra o realización de la medición Pesar 5 g de muestra pulverizada y tamizada en Erlenmeyer de 1 litro, agregar 400 ml de agua destilada, mezclar y calentar a ebullición Agregar 10 g de óxido de magnesio, hervir lentamente por 2 horas con agitación ocasional Adicionar agua para prevenir la formación de espuma y lavar las paredes del matraz. Enfriar y filtrar Acidular el filtrado con 10 ml de ácido sulfúrico (1+9) y colocar nuevamente a hervir hasta reducir el volumen a un tercio Una vez frío, filtrar y extraer en un embudo de decantación con 3 porciones de cloroformo (30, 25 y 20 ml) Pasar la fase orgánica a otro embudo de decantación Extraer la fase clorofórmica con 5 ml de solución de hidróxido de potasio al 1% y pasar la fase orgánica a una cápsula previamente tarada a través de sulfato de sodio anhidro Lavar la solución alcalina 2 veces con 10 ml de cloroformo y reunir estas porciones en la cápsula Evaporar los extractos clorofórmicos en baño de agua hirviente. Secar en estufa a 105 ºC hasta peso constante. 7.7 Cálculo de Resultados: C= % Cafeína (base húmeda): C = (a - b) x 100 p Donde: a: peso de la cápsula más residuo, g b: peso de la cápsula sin residuo, g p: peso muestra, g
4 ME Página 4 de 5 También se puede calcular % de cafeína en base seca. C x 100 % cafeína (base seca) = % humedad Para verificar la pureza de la cafeína obtenida, se determina nitrógeno del residuo según Kjeldahl y se calcula la cafeína anhidra multiplicando por (1 ml de ácido sulfúrico 0.1 N equivale a 4.85 mg de cafeína). Promediar valores y expresar resultados con dos decimales. 7.8 Aseguramiento de la calidad del ensayo Realizar las muestras en duplicado Realizar prueba de testigo de reactivo En paralelo al análisis, realizar curva de calibración y determinar recuperación del estándar. 8. CONTROL DE REGISTROS IDENTIFICACION RESPONSABLE TIEMPO RG Registro de análisis químico en alimentos Encargado de Laboratorio de Nutrientes, Aditivos y Contaminantes ALMACENAMIENTO MEDIO SOPORTE 5 años Papel LUGAR RESPONSABLE/ RECUPERACIÓN Laboratorio Nutrientes, Aditivos y Contaminantes DISPOSICION Triturado en papel de reciclaje después de 5 años. 9. CONTROL DE CAMBIOS VERSION FECHA PRINCIPALES PUNTOS MODIFICADOS RESUMEN DE MODIFICACIONES 3 Todos Cambio de formato de PRT a ME
5 ME Página 5 de CUADRO DE RESPONSABILIDADES Ejecuta el método Técnico o personal con competencias. Elabora el informe de resultados Profesional encargado del Laboratorio. Aprueba el informe de resultados Jefatura Subdepartamento. 11. ANEXOS No Aplica
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